程序升温是指色谱柱的温度按设置的程序连续地随时间线性或非线性逐渐升高,以使低沸点组分和高沸点组分在色谱柱中都有适宜的保留、色谱峰分布均匀且峰形对称。各组分的保留值可用色谱峰高处的相应温度即保留温度表示。
程序降温仪温度的准确性可能会对PCR的成败与否起决定性作用。加热模块上孔与孔之间的温度一致性对于获取可靠而可重复的PCR结果也是至关重要的。确保热准确性的一种方法就是经常使用温度验证试剂盒进行检测,并根据需要由接受过培训的专业人士进行重新校准。温度验证检测通常可用于:在等温模式下相对于设定温度的孔间准确性;在温度转换后相对于设定温度的孔间准确性;热盖温度的准确性。
程序降温仪在样品冻存过程中,降温速率是影响细胞复苏活性的关键因素:过快/过慢都会对细胞造成损伤以致影响复苏活性。降温速度过快时,细胞内的水迅速结晶,冰晶会对细胞造成内部损伤;如果降温速度过慢,细胞外的水先结冰,会在细胞内外产生渗透压,会造成细胞脱水,降低细胞复苏率。但这些问题,可对降温速率的“精细控制”轻松解决——降温的不同阶段,采用不同的降温速率,可有效减少细胞损伤,提高复苏率。一般为“先慢冻,后快冻”。
程序降温仪工作原理是:通过微处理器控制系统和电磁阀,控制喷入腔体中的液氮量来准确控制降温速率。其优点是:控温准确,受外界环境影响小。尤其是处理大体积样本时,快速喷入的大量液氮更易带走样本中的潜热,从而快速降温,保证更好的样本复苏活性。